胡节立^1,2 , 杨郁文² , 凌溪铁² , 王金彦² , 吴婧¹ , 张保龙² , 王荣富^1*

1安徽农业大学生命科学学院, 合肥, 230000;
2江苏省农业科学院农业生物技术研究所, 江苏省农业生物学重点实验室, 南京, 210014
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2016 年, 第 14 卷, 第 9 篇   
收稿日期: 2015年09月25日    接受日期: 2015年11月06日    发表日期: 2016年01月11日

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多梳蛋白（Polycomb protein）在植物表观遗传调控中起重要作用。已公开的番茄转录组表明一个多梳蛋白基因LeEMF2在抗病番茄CLN2777A中受番茄黄化曲叶病毒（TYLCV）诱导表达。为明确LeEMF2抗TYLCV的作用，我们以CLN2777A为材料，通过RT-PCR克隆该基因全长序列，荧光定量PCR研究LeEMF2的表达模式，并利用病毒诱导的基因沉默（VIGS）技术研究LeEMF2沉默后对番茄抗TYLCV的影响。LeEMF2的开放阅读框为1917bp，编码长为638个氨基酸的蛋白。结构域分析表明其含有一个C₂H₂锌指结构域以及一个VEFS盒，与拟南芥EMF2氨基酸相似度为58.3%。荧光定量PCR发现LeEMF2基因在花、根以及茎顶端生长点的表达量较高，在茎和老叶中表达量次之，在嫩叶中的表达量最低。接种TYLCV 5天后，LeEMF2基因在CLN2777A中上调表达1倍左右，而在感病番茄TMXA48-4-0的表达则无明显变化。通过农杆菌浸润法将VIGS沉默载体注射CLN2777A子叶15天后，LeEMF2在沉默番茄植株中的表达量仅为野生型CLN2777A的13-48%，且沉默株的植株新叶卷曲、皱缩, 说明LeEMF2基因对番茄的生长发育、形态建成具有重要作用。LeEMF2沉默植株接种TYLCV15天后，荧光定量PCR检测发现沉默植株的病毒量为野生型植株的1.7倍，说明LeEMF2对TYLCV的抗性作用有一定的影响。 

LeEMF2；番茄黄化曲叶病毒；病毒诱导基因沉默；功能分析